一， 研究室背景介绍
1. 研究方向：紧扣食物安全问题, 应用微生物学和生物技术, 重点研制功能饲料食品添加剂和新型药物原料等新型安全产品, 包括抗菌肽, 葡聚糖酶, 菊粉酶, 右旋糖苷蔗糖酶基因工程菌构建和微生态制剂等生物饲料产品研发工作。
2. 成果：2000-2006年主持 “863”等国家研究计划共13项，取得成果如下：（1）国际领先或先进水平部成果13项，其中2001年度国家科技进步2等奖1项（第3名），2004年度和2005年度北京科学技术2等奖2项（第1名）。（2）发明专利13项（8项获授权）；注册CGMCC专利菌5个和GenBank基因序列号10个；国家、省级重点新产品证书5个。（3）论著50多篇，其中SCI论文8篇，EI论文5篇，SCI总IF约21，SCI、EI引用20多篇次，CA、PubMed收录30余篇次；被国内期刊、优秀博硕士论文、科学出版社、高教出版社、北大出版社、化工出版社、中国环境科学出版社专著等共引约千余次。
3. 代表性学术成就：（1）抗菌肽基因工程和肽工程研究：建立了小基因和小肽分子研究材料与方法，包括全基因优化设计、非镜象对称串联、融合与分泌表达、融合蛋白切割等工作。国内外首次构建新抗菌肽LfB 25工程菌工作具原创性，论文在《Protein Expression & Purification》（SCI, IF=1.5）发表。3篇Lfcin 15抗菌肽基因工程论文被《7th Intl Lactoferrin Conf》录用（墙报，2005，Hawaii），均在《Biochemistry & Cell Biology》（SCI, IF=3.2）发表。（2）β-1,3-1,4葡聚糖酶、寡糖相关酶和微生态制剂研究：构建了3种菊粉酶基因工程菌和5种β-1,3-1,4葡聚糖酶工程菌。采用套叠PCR和分子搭桥技术全基因优化设计合成和表达全新β-1,3-1,4葡聚糖酶基因，方法有新意且表达水平具生产意义，论文在《Appl Microbiol & Biotechnol》（SCI, IF=2.4）发表；采用超保真酶和长基因PCR技术在国内首次完成了4.5kb右旋糖苷蔗糖酶(原料药关键酶)基因克隆和表达；创建的果寡糖纯化联合工程产物率>80%，突破了50%限制；部分论文被SCI、CA收引。基因工程菊粉外切酶论文在9th Europe Inulin Seminar作报告（2002, Budapest）。基因工程菊粉内切酶论文在5th Intl Fructan Symp作报告，5篇论文被录用(墙报, 2004, Havana)。（3）关于螯合剂、蛋白酶与曲霉原生质体释放和再生关系研究提出的双向调控模式(1997)论文被CA和细胞学专著等收引。1990年代提出了酸性逆境与植物活性氧代谢机理模型，91年作为“自由基与农业分会”组长参加了《3届全国自由基生物学与医学学术会议》并作报告（重庆）。该模型引用出版物包括SCI、CA、163种CSCD期刊的266篇论文、81篇博硕论文（2000—04）和高教出版社、北大出版社专著等。
二，2000年以来第一主持的研究计划与课题
1. 国家自然科学基金，降解法制备果寡糖的菊粉内切酶研究No.39970549, 2000-2002
2. 北京市自然科学基金，牛乳源新抗菌肽基因设计、合成、表达及构效关系研究，No.5062031，2006-2008
3. 863计划, 新型安全饲料添加剂研制与开发No.2001AA246041和2004AA246040, 2001-2005
4. 948引进国际先进农业技术项目，一步酶法制备菊粉果糖工程技术No.2001-244, 2000 – 2004
5. 国家科技部科研院所社会公益研究专项项目子课题，基于受体的多种beta 2激动剂残留的分子检测技术研究，No.2005DIB4J040, 2005 – 2007
6. 国家饲料工程技术研究中心在建项目子课题，菊粉酶一步法制备高果糖浆No.950000，2001- 2004
7. 农业部农业科技成果转化示范项目, 酶法生产低聚寡果糖饲料添加剂,批准文件: 2003年, 农业部文件, 农计函（2003）165号。2003-2005
8. 科技部农业科技成果转化基金, 酶法生产无公害饲料添加剂低聚果糖的中试, No.02 EFN216900723, 2001- 2003
9. 味精废水无害化处理和饲料蛋白资源开发研究，委托研究项目（河北梅花味精集团公司），2005- 2006
10.微生物发酵饲料蛋白和活菌制剂研制，委托研究项目（河北东信生物科技有限公司），2005-2008
三， 成果
（一）获奖成果
1. 2005年度北京科学技术奖，二等，第1完成人。动物用微生态制剂研制与开发，编号2005农-2-002-01.
2. 2004年度北京科学技术奖，二等，第1完成人。高产菊粉酶酵母与菊粉高果糖浆制备技术，编号2004农-2-003-
3. 2001年度国家科技进步奖，二等，第3完成人。基因工程酵母生产饲料用植酸酶, 编号J-203-2 -05-R03.
（二）登记的主要鉴定、验收成果
1. 天然与基因工程beta-1,3-1,4-葡聚糖酶研制与开发, 农业部鉴定,农科果2006鉴字第042号，2006年5月27日；科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发”成果：2001AA246041-02, 2003年12月22日；2004AA 246040-02, 2005年10月13日。
2. 反刍动物用酵母与乳酸菌制剂研制与开发, 农业部鉴定,农科果2006鉴字第043号，2006年5月27日。
3. 动物用微生态制剂研制与开发, 农业部鉴定,农科果2005鉴字第022号，2005年3月1日。科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发2004AA 246040”成果2004AA246040-04, 2005年10月13日。
4. 高表达菊粉内切酶基因工程酵母, 农业部鉴定,农科果2003鉴字第053号，2003年8月16日。科技部验收成果2001AA 246041-01, 2003年12月22日。
5. 高产菊粉外切酶基因工程酵母, 农业部鉴定, 农科果2002鉴字第040号，2002年5月25日。
6. 果糖基转移酶与蔗果寡糖研制，科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发2001AA 246041”成果2001AA246041-03, 2003年12月22日。
7. 微生物青贮剂研制与产业化,科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发2001AA 246041”成果2001AA246041-04, 2003年12月22日。
8. 产酶益生菌研制与产业化, 科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发2001AA246041”成果2001AA246041-05, 2003年12月22日。
9. 基因工程菊粉内切酶与菊粉寡糖中试研究,科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发2004AA246040”成果2004AA246040-01, 2005年10月13日.
10. 全基因设计、合成LfcinB衍生物基因及基因工程菌构建,科技部验收, 863计划“新型安全饲料添加剂研制与开发2004AA246040”成果2004AA246040-03, 2005年10月13日.
11. 一步酶法制备菊粉果糖工程技术,农业部验收,948成果(2001-244),2005年12月26日。
(三) 发明专利
1. 一种产生菊粉酶的酵母菌株及其在高果糖浆中应用, ZL98120697.2; 2003年授权。
2. 食品用天然鲜味强化剂造技术, ZL00100411.5; 2003年授权。
3. 产生果糖转移酶的新菌株及其生产低聚果糖的方法, ZL00100443.3; 2004年授权。
4. 一种β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因和地衣芽孢杆菌EGW039,ZL01134381.8; 2004年授权。
5. 表达β-1,3-1,4-葡聚糖酶的基因工程菌株酵母，03153635.2; 2004年公开。
6. 黑曲霉菊粉内切酶基因和表达该基因重组毕赤酵母菌株,03153636.0;2005年公开 。
7. 一种外切菊粉酶生产方法, 02124145.7; 2004年公开。
8. 近平滑假丝酵母,热带假丝酵母和新隐球酵母检测鉴定方法, ZL02123445.0; 2005年授权.
9. 青贮用乳酸菌接种剂及其制造技术, ZL02123443.4; 2006年授权。
(四) 注册CGMCC专利保护菌株—5个 1, Kluyveromyces marxianus IW9801, CGMCC0360; 2, Aureobasidium pullulans FW9901, CGMCC0436; 3, Bacillus licheniformis EGW039, CGMCC0635; 4, Aspergillus niger 9891, CGMCC0991; 5, Pichia pastoris EXI2086, CGMCC0763
(五) 注册GenBank基因序列— 10个 1, AF546870；2, AF546871；3; AY160108；4; AY160109；5; AY383481；6, AY569034；7, AY383482；8, AY649443; 9, DQ251730; 10, DQ251731。
(六) 新产品批号 1. 国家级重点新产品,食品级外切菊粉酶INU2000, 编号：2002ED326016, 2002 2. 国家级重点新产品,高纯度低聚合度低聚果糖FOS80, 编号：2005ED125005, 2005
四, 论文（著）目录：
（一）生物技术实验研究论文
1. Xingjun Feng, Jianhua Wang, Anshan Shan, Da Teng, Yalin Yang, and Yi Yao, Guanpin Yang, Yanchun Shao, Shuo Liu, and Fan Zhang. Fusion expression of bovine lactoferricin in Escherichia coli, Protein Expression & Purification, 2005，47(1):110-117. And In: Poster session I, No.3, 7th Lactoferrin Conf Symp., 2005, Hawaii; And In: Biochemistry& Cell Biology, 2006, 84(6): 402 (Abs)
2. Da Teng, Jianhua Wang, Ying Fan, Yalin Yang, Zigang Tian, Jin Luo, Guanpin Yang, and Fan Zhang. Cloning of Bacillus licheniformis EGW039 (CGMCC0635) β-1,3-1,4- glucanase gene and its expression in Escherichia coli BL21(DE3), Appl Microbiol & Biotechnol, 2006, DOI: 10.1007/s00253-006-0329-2. Epub 2006 Feb 10
3. Zigang Tian, Jianhua Wang, Da Teng, Yalin Yang, Fan Zhang, Xingjun Feng, Lingyun Wei,Ying Fan, and Jin Luo. Comparison of antimicrobial activity between lactoferricin B 15 derivative and antibiotics (Abs), Biochemistry& Cell Biology，2006，84(6): 386
4. Zigang Tian, Jianhua Wang, Da Teng, Yalin Yang, Fan Zhang, Xingjun Feng, Lingyun Wei,Ying Fan, and Jin Luo. Design and construction of tandem multimers lactoferricin B 15 derivative for high-level expression in E. coli (Abs), Biochemistry& Cell Biology，2006，84(6): 390
5. Zigang Tian, Da Teng, Yalin Yang, Xingjun Feng, Ying Fan, Jin Luo, Fan Zhang, and Jianhua Wang. Multimerization and fusion expression of bovine lactoferricin derviative
6. Lfcin B-W4,10 in Escherichia coli. Biochemistry& Cell Biology，August 1, 2006，accepted, BCB 06367
7. Wei Lingyun, Wang Jianhua, Zheng Xiaodong, Teng Da, Yang Yalin, Cai Chenggang, Feng Tianhua, and Zhang Fan. Studies on the extracting technical conditions of inulin from Jerusalem artichoke tubers, Journal of Food Engineering, DOI：10.1016/j.jfoodeng. 2006.03.028
8. Wang Jianhua, Wu Zilin, and Michael K Woolford, et al., A study on the effect of the bacterial inoculant on corn silage quality, digestibility and performance in dairy cattle. High Technology Letters; 2005,11(2):211-216.
9. Wang Jian-Hua, Teng Da, Yao Yi, Yang Yalin, and Zhang Fan. Cloning and expression of Aspergillus niger 9891 endoinulinase in Pichia pastoris. High Technology Letters; 2004, 10(4): 52-56.
10. 滕达, 王建华, 张帆等. 黑曲霉（CGMCC0991）菊粉内切酶基因克隆及序列分析, 高技术通讯，2004，14S：213-217.
11. 杨雅麟, 王建华, 滕达, 张帆. 一种新的β-D-果糖基转移酶选择性生产GF2低聚果糖的研究, 高技术通讯，2004，14S：209-212.
12. 王建华，杨雅麟，滕达，张帆.生物饲料添加剂创新研究和产业发展的现状与对策.高技术通讯，2004，14（10）：94-99.
13. Wang Jian Hua et al., A preliminary study on high-density cell cultivation of Kluyveromyces marxianus IW9801 (CGMCC 0360) secreting inulinase and recombinant Pichia pastoris exi 2086 overexpressing inulinase. Session 5, Symp of Intl Conf On Agric Scis & Technol, p 371-374. Nov. 2001, Beijing, China; And, oral report, 9th Europe inulin seminar, Budapest, April 2002.
14. Wang Jian Hua, Teng Da, Yao Yi, Yang Yalin and Zhang Fan. Cloning and Expression of A. niger 9891 endoinulinase in P. methanolica and P. pastoris. In: Program and Abs of 5th Intl Frutan Symp., p41; And oral report, Dec. 2004, Havana
15. Wang Jian Hua, Yang Yalin, Teng Da, and Zhang Fan. Study on beta- D- fructosyltranferase (Ftase) from Aureobasidium pullulans (CGMCC0436) and fructooligosaccharides(FOS) synthesis from sucrose. In: Program and Abs of 5th Intl Frutan Symp., p46. 2004, Havana.
16. 王建华, 张帆, 滕达, 杨雅麟.分离菊芋和菊苣菊糖的离子色谱法, In: Program & Abs of 5th Intl Frutan Symp., p34. Dec.2004, Havana
17. 杨雅麟, 王建华, 张帆, 滕达.薄层层析法分离菊芋汁中的低聚糖, In: Program & Abs of 5th Intl Frutan Symp., p33. Dec. 2004, Havana
18. Wang JianHua, Teng Da, Yao Yi, Yang Yalin and Zhang Fan. Cloning and expression of Aspergillus niger 9891 endoinulinase in Pichia methanolica. 新型安全饲料添加剂研制与开发（王建华主编）, 科学出版社, 北京：2005, p80-92.
19. Teng Da, Wang JianHua,Yao Yi, et al., Cloning and expression of beta-1,3-1,4-endo- glucanase gene eg1314 from Bacillus licheniformis EGW 039 (CGMCC 0635), 新型安全饲料添加剂研制与开发（王建华主编）,科学出版社, 2005，p102-108.
20. 邵彦春, 王建华,杨雅麟,陈福生,滕达等. 产右旋糖苷蔗糖酶细菌筛选及其产酶初步研究, 新型安全饲料添加剂研制与开发（王建华主编）,科学出版社, 2005, p122-126.
21. 邵彦春,王建华,滕达等.肠膜明串珠菌右旋糖苷蔗糖酶基因克隆及序列分析，微生物学通报，2005，32（3）：20-23.
22. 王建华, 滕达,姚怡等.菊粉内切酶基因克隆及其重组表达载体构建.载：李学勇主编：中国首届农业生物技术发展论坛文集,中国农业出版社. 2003，p257-261.
23. 王建华等. 高产菊粉酶酵母筛选，发酵和酶学性质研究. 生物工程学报，2000; 16(1)，60- 64.
24. 王建华等.酶法制备高果糖浆及产酶菌体营养价值研究.食品与发酵工业, 2000; 26 (2), 26-30.
25. 王建华, 赵学慧.曲霉及其融合子遗传性状研究. 真菌学报, 1999; 31:301-306.
26. 王建华, 赵学慧. 曲霉种间融合子产淀粉酶条件优化研究, 中国食品学报，2006，6（3）：38-43.
27. 张帆, 王建华等. 菊粉寡糖促进嗜酸乳杆菌生长的研究,食品与发酵工业，2004，30(4): 49-51.
28. 张帆, 王建华等. 嗜酸乳杆菌培养条件及其生物学特性研究,食品与发酵工业,2005, 31（3）: 43-46.
29. 张帆, 王建华.粪链球菌特性及活菌数检测方法,中国饲料, 2002,23,18-19.
30. 张帆, 刘立恒,滕达,王建华. 植物乳杆菌和戊糖片球菌活菌计数检测，饲料广角，2002; 21: 38-39.
31. 张帆, 王建华,刘立恒. 饲用嗜酸乳杆菌拮抗特性研究,中国饲料,2004, 22: 9-11.
32. 黄忠,周响艳, 王建华等.中草药益生菌联合制剂研制. 中国畜牧兽医, 2004,5:7-9.
33. 李军训,高洁, 王建华等. 青贮乳酸菌的发酵生物量研究.饲料工业，2004，25（7）：48-51
34. 刘立恒, 王建华,张帆,杨雅麟,滕达. 乳酸杆菌和酵母菌联合发酵苹果渣的研究, 新型安全饲料添加剂研制与开发（王建华主编）,科学出版社, 2005, p102-108.
35. 刘立恒, 王建华,张帆,杨雅麟,滕达. 筛选乳酸杆菌生物学特性研究，新型安全饲料添加剂研制与开发（王建华主编）, 科学出版社, 2005, p147-154.
36. 刘立恒, 王建华,张帆,杨雅麟,滕达.猪源性乳酸杆菌快速筛选模型的建立, 新型安全饲料添加剂研制与开发（王建华主编）,科学出版社, 2005, p256-261.
（二）综述
37. 冯兴军, 王建华, 单安山. 抗菌肽基因工程研究及其表达策略，中国生物工程杂志, 2006, 26（3）: 63-67.
38. 冯兴军, 王建华, 杨雅麟, 滕达等. 乳铁蛋白肽Lactoferricin作用机制研究进展，中国生物工程杂志, 2004, 24（1）: 23-26.
39. 冯兴军, 王建华, 单安山. 抗菌肽Lactoferricin生物学功能及其应用研究进展, 天然产物研究与开发, 2005, 17（1）：122-125.
40. 王建华. 微生物低聚果糖合成酶及其应用研究述评.天然产物研究与开发,2003,15（6）: 544-551.
41. 王建华. 微生物菊粉酶基因结构、酶学性质与应用研究进展，天然产物研究与开发, 2001，13(1): 83-89.
42. 王建华, 徐长警. 菊粉果糖研究与开发. 中国甜菜糖业，2004，4：10-14.
43. 魏凌云, 王建华,郑晓冬,杨雅麟. 菊粉研究的回顾与展望, 食品与发酵工业，2005，31(7): 81-85.
44. 华承伟, 王建华等.菊粉化学和微生物菊粉内切酶研究进展. 中国食品学报, 2004, 4 (3): 5-10.
45. 邵彦春, 王建华,陈福生,滕达.细菌右旋糖酐蔗糖酶研究进展,中国食品学报. 2003; 3S: 444- 447.
46. 滕达, 王建华.微生物beta-1,3-1,4-葡聚糖酶研究进展, 中国食品学报, 2003, 3S:423- 429.
47. 王建华等. 安全饲料添加剂—动物微生态制剂研发进展. 载：李学勇主编：中国首届农业生物技术发展论坛文集,中国农业出版社. 2003，p188-195.
48. 刘立恒, 王建华.提高苹果渣功能性价值的发酵技术研究进展,In:《新型安全饲料添加剂研制与开发》（王建华主编）,科学出版社, 2004, p64-71. （三）主编、参编书
49. 王建华,《新型安全饲料添加剂研制与开发》,主编, 41.5万字,科学出版社, 2005。
50. 王建华,《食品安全检测与现代生物技术》,第3主编, 12万/46万字,化工出版社, 2004。
51. 王建华,《菊芋》,第二主编, 11万字,台海出版社,2005。
五，研究室成员：
王建华，研究员，博导，室主任，农业部有突出贡献的中青年专家，“新世纪百千万人才工程”国家级人选。1961年11月生于湖北。1981年毕业于华中农学院荆州分院农学专业。华中农业大学农学硕士（植物生化）和理学博士（微生物学）。里斯本理工大学博士后（生物技术）。
滕 达，助研，生物技术学士，微生物学专业硕士。杨雅麟，助研，植物遗传育种学硕士；2006级生物化学与分子生物学专业在职博士生。
田子罡，研实员，微生物学专业硕士。
罗 靳，2004级微生物学专业硕士硕士研究生。
樊 英，2004级微生物学专业硕士硕士研究生。
董天堂，2005级生物化学与分子生物学专业硕士研究生。
联系人：杨雅麟老师
地址：北京中关村南大街12号 邮政编码 100081
中国农业科学院饲料研究所基因工程研究室
电话：010-82106079
E-mail:wangjianhua@mail.caas.net.cn